凍結乾燥アメーバ細胞溶解物（LAL 試薬）によるエンドトキシン試験アッセイ

凍結乾燥アメーバ細胞溶解物（LAL 試薬）によるエンドトキシン試験アッセイ

LAL試薬: 凍結乾燥されたアメーバ細胞溶解物 (LAL) は、大西洋カブトガニからの血球 (アメーバ細胞) の水性抽出物です。
TAL 試薬: TAL 試薬は、Tachypleus tridentatus からの血球の水性抽出物です。
現在、LAL/TAL 試薬の主な生産は米国と中国です。

ゲル血餅エンドトキシン試験アッセイは、ヒトへの注射薬の安全性要件を満たすために、この方法が依然として世界中で主に応用されています。
現在、Bioendo は、単一試験ガラスアンプルおよび複数試験バイアルを含むゲル凝固 LAL 試薬を製造および供給しています。
https://www.bioendo.com/gel-clot-endotoxin-assay/ G01、GS44、G02、G17、G52
これは、薬物検査におけるエンドトキシンの定性検出のための経済的なソリューションです。特に、WFI、API、または最終医薬品中のエンドトキシンを検査するための注射薬または非経口薬に適しています。エンドトキシン検査アッセイは操作操作の要求が高く、正しい結果を確実に得るためにゲル凝固アッセイを扱う熟練したオペレーターが必要です。

完全なソリューションG52エンドトキシン試験アッセイ:
LAL試薬
コントロール標準エンドトキシン
ベットウォーター
エンドトキシンフリーのピペットチップ
エンドトキシンフリーのガラス管（希釈操作管および反応管を含む）。
培養器具はウォーターバスまたは乾熱インキュベーターを推奨します。すべての培養装置には温度精度が必要です。
すべての消耗品は、エンドトキシンフリーレベル「< 0.005EU/ml」の基準を満たす LAL アッセイに使用されます。
実験環境はエンドトキシンの検出に適したものでなければなりません。

注意を払う ：
ピペットチップやマルチウェルプレートなどのプラスチック消耗品は、エンドトキシン検査に広く使用されています。統一薬局方 (USP/CP) では、プラスチック消耗品やガラス管には検出可能なエンドトキシンが含まれていないことが求められています。また、同様に重要ですが、考慮されていないことも多く、干渉因子が含まれていないという基準も満たさなければなりません。

エンドトキシン検査アッセイを操作してサンプル中のエンドトキシンを検出するにはどうすればよいですか?
まず最初に、標識ライセートの感度を確認するためのテストを実行する必要があります。感度がラベルマークと同じであることを確認します。
サンプル分析では、干渉前エンドトキシン テスト アッセイを実施します。
完全なエンドトキシン測定「干渉試験」を実施します。
サンプル中のエンドトキシンレベルを取得するための限界テストを実行します。

標識ライセートの感度を確認するためのテストを実行すると、結果が異常になります。2 Lamada ではゲルが形成されませんか?
細菌管理標準エンドトキシンの調製方法が正しいか確認してください。
各希釈液についてボルテックス混合が必要です（詳細については、取扱説明書または対照標準エンドトキシンの添付文書を参照してください）。
ライセート試薬がコントロール標準エンドトキシンと一致するかどうかを確認します。

ライセート試薬の定温プロセスにはウォーターバスまたは乾熱インキュベーターを使用することをお勧めします (たとえば、インキュベーターやドライボックスは効果的ではありません)。
インキュベーション中、ウォーターバス内の水環境は静的で安定しており、あらゆる振動が回避されます。
水流ポンプをオフにする場合は、水槽に特に注意してください。

結果を判断するには、試験管またはガラスアンプルを恒温槽からそっと取り出し、ゆっくりと 180 度反転させ、
チューブ内のゲル形成は変形せず、滑り落ちません。結果は信号「+」で記録されました。
ゲルが形成されないか、ゲルの塊が形成されてもそのままの状態を保つことができません。
壁滑りは負であり、結果は信号「-」で記録されました。
迅速ゲル血餅エンドトキシン検査キットは、ゲル血餅エンドトキシン検査方法に属します。
迅速なゲル凝固エンドトキシン検査では、サンプル陽性対照はゲルを生成しませんか?
まず、細菌エンドトキシン試験水を使用してライセート試薬を検証し、オペレーターと環境が規制を満たしていることを確認します。

キットが認定されている場合、サンプルのポジティブコントロールはサンプルの阻害効果によりゲルを形成しないため、サンプルを処理して処理する必要があります。
最も一般的なサンプル処理方法は希釈です。