細菌エンドトキシン検査への発色技術の応用

発色技術は、カブトガニ (Limulus Polyphemus または Tachypleus tridentatus) の青い血液から抽出されたアメーバ細胞溶解物を使用して、グラム陰性菌からの内毒素を検出または定量するためのゲル凝固技術および比濁技術も含む 3 つの技術の 1 つです。これは、使用される特定のアッセイ原理に基づいて、エンドポイント発色アッセイまたは動態発色アッセイとして分類できます。

反応原理は次のとおりです。変形細胞溶解物には、細菌の内毒素によって活性化されるセリンプロテアーゼ酵素 (プロ酵素) のカスケードが含まれています。エンドトキシンはプロ酵素を活性化して活性化酵素(コアグラーゼと呼ばれる)を生成し、後者は無色の基質の分解を触媒し、黄色の生成物pNAを放出します。放出された pNA は 405nm で測光的に測定できます。また、吸光度はエンドトキシン濃度と正の相関があり、それに応じてエンドトキシン濃度を定量化できます。


投稿日時: 2019 年 9 月 29 日